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        小叮当口袋里的各种法宝令Western blots操作更快,更敏感,也更可靠。

Western Blot实验操作进阶技巧
       除非是Western blot实验方面的高手,要不就像在我看来,Western blot发展至今好像与其1979年刚被发明出来的时候一样一样,同样也是根据蛋白不同的大?。ɑ虻绾桑┙械缬痉掷?,然后转膜,利用抗体筛选出目标蛋白。

       多年来这种技术已经成为了蛋白研究方面的一种主要技术,研究人员可以利用Western blot定性,甚至半定量的识别组织和培养细胞中的蛋白,这种操作实验可以说每天都会在实验室里上演,但同时,Western blot等blot技术也是各种审议的主题,学术造假,以及一些研究成果被退回的原因……




      减少样品量


过去几年里,研究人员已经迈出了检测单个细胞中DNA 和 RNA的重要一步,相比之下,蛋白检测已经落在后面。蛋白抗体质量不过关是主要的原因,这限制了研究人员在使用流式细胞仪和免疫细胞化学方法进行单细胞蛋白水平检测的精确度。而且Western blot实验需要分离得到蛋白,然而迄今为止这在单细胞中还无法做到。

Science技术指南:Western Blot新品新技术
Western Blotting前传:想成为高手吗?[心得点评]



      实验操作加速


从开始到结束,传统的Western blot操作需要大约两天半的时间,如果还要重做,加上样品量很大的时候,真是会让人崩溃?!拔乙鲂矶郬B实验,检测所有的样品,这真是费时费力,”来自加州大学旧金山分校的博士后研究员Jillian Silva说。

蛋白印迹新革命——7分钟完成Western Blot
Western Blot实验操作指南优化(中)



      蛋白内参


研究人员为了能定量分析目标蛋白,一般来说都会将其与溶液中的其它单一蛋白进行比对,如GADPH、 β-肌动蛋白或微管蛋白等,这些蛋白的表达水平量一般认为是维持不变的。

Western Blot实验操作指南优化(上)[实验技巧]


      傻瓜Western blot操作系统


Western blot技术发展至今,其繁琐的步骤其实并没有多大变化,虽然通过一些科学家们的优化,这些步骤有了些变化,但手工步骤越多,出错的几率也越大。因此研究人员希望能自动化这一过程。

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Western Blot实验操作指南优化(下)





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